赛鸽鹦鹉性别鉴定FLU-ARMS试剂盒A

SNP（单核苷酸多态性）分析也是一种常用的禽类DNA鉴定方法。SNP是基因组中最常见的遗传变异形式之一，它们在不同性别之间可能存在差异。通过对特定SNP位点进行基因分型，可以确定禽类的性别， FLU-ARMS 是用竞争性等位基因特异性PCR检测SNP的一种方法。适合于各种基因分型研究，无论是中低通量SNP研发项目，NGS之后的SNP验证等都是其适用的范围

本产品可以检测赛鸽鸽，鹦鹉（牡丹，和尚，玄凤等）性别鉴定。只需要3~4根带根管的新鲜羽毛就可以检测

货号：

产品名称	方法	规格	价格
赛鸽性别鉴定FLU-ARMS试剂盒FBG-005	FLU-ARMS	250次	700元
赛鸽性别鉴定FLU-ARMS试剂盒FBG-010	FLU-ARMS	500次	1200元
赛鸽性别鉴定FLU-ARMS试剂盒FBG-100	FLU-ARMS	5000次	10000元

组份：	250次	500次	5000次	保存方式
FLU-ARMS 鸟类性别鉴定试剂（5ul/次） 1.25ml	1.25mlX1管	1.25mlX2管	1.25mlX20管	-20度一年，4度3天
鸟类FLU-ARMS 检测引物（0.15ul/次）	50ul	100ul	1000ul	-20度一年，4度3天
矿物油	5ml	10ml	100ml	25度，1年
羽毛DNA裂解液（400ul/次）	100ml	200ml	2000ml	25度，1年

使用方法
1. 制备模板DNA：

一根羽毛根管插入直扩裂解液400ul的EP管内，关闭盖子，95度10分钟水浴。开盖提取上清10ul，并加入140ul纯净水作为模板DNA备用。

2. 反应管中加入以下组份：

添加组分	有羽毛样品组	无羽毛NTC组
模板DNA	5ul	水5ul，不加模板DNA
FLU-ARMS 鸟类性别鉴定试剂（5ul/次）	5 μl	5 μl
鸟类FLU-ARMS 检测引物	0.15ul	0.15ul
矿物油	15ul	15ul
	总：25.15 μL	总：25.15 μL

3.PCR反应条件

step 1	预变性	95℃	5 min	1 循环
step 2	扩增	95℃	*5 s*	38~45循环
step 2	扩增	58℃	20 s	38~45循环
step 3	读板	30℃	30 s （read）	1 循环

备注：

表格中的循环数仅供初步参考，实际 DNA模板浓度和引物效率会影响实际需要的循环数，具体确定方法可参考以下：

1. 如38个循环后，发现分型非常明显，且NTC（用于溶解模板的溶液）信号过高，与其他分型掺杂，下次扩增循环数调整为33；

2. 如38个循环后，发现所有信号区分不开，则将PCR产物用step 2的程序继续扩增5~ 7个循环后，再扫描荧光。

3. 每次上机都要做一个NTC对照，以便分析结果

4. 不同鸟类可以同时上机，每次数据分析单独分析

观察结果：

荧光扫描后，相对于对照NTC，公鸟判断为：FAM荧光高，HEX荧光低，图形基因型为FAM。母鸟判断为：FAM荧光高，HEX荧光高，图形基因型为杂合子

案例1：

样品名称	孔位	X轴终点荧光	Y轴终点荧光	分型结果
NTC	A10	599.9	354.0	阴性
NTC	B10	473.5	440.3	阴性
蓝闪派	C10	1015.8	408.1	FAM	公
红头绿闪	D10	1110.3	402.2	FAM	公
松石伊莎）	E10	771.5	1037.6	杂合子	母
薄荷绿）	F10	1039.7	402.0	FAM	公
紫伊莎深色	G10	1067.6	421.2	FAM	公
紫伊莎淡色	H10	870.6	1023.3	杂合子	母

案例2：

样品名称	孔位	X轴终点荧光	Y轴终点荧光	分型结果		分型数值
NTC	A10	599.9	354.0	阴性		0.000%
NTC	B10	473.5	440.3	阴性		0.000%
玄凤黑牛1	G11	1059.0	374.0	FAM	公	99.740%
玄凤黑牛2	H11	1132.6	198.9	FAM	公	80.540%

案例3：

样品名称	孔位	X轴终点荧光	Y轴终点荧光	分型结果		分型数值
白面中趴	E11	718.7	965.7	杂合子	母	100.000%
白面高趴	F11	756.7	795.9	杂合子	母	100.000%
金冠百趴	G11	1106.5	377.4	FAM	公	99.220%
NTC	H11	621.2	302.8	阴性		0.000%
NTC	G12	492.4	426.4	阴性		0.000%
NTC	H12	409.8	545.4	阴性		0.000%